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艾滋病检测样品的采集处理和送检指南
发布日期: 2009-03-14 浏览次数: 撰稿人: 部所: 字体:

1.   目的

规范艾滋病病毒(HIV)检测的血清、血浆和全血样品的采集处理和送检要求。

 

2. 适用范围

适用于HIV抗体检测、抗原检测、核酸检测、CD4+/CD8+T淋巴细胞测定样品的采集处理和送检。

 

3. HIV检测样品的采集处理和送检程序

HIV检测最常用的样品是血液,包括血清、血浆和全血。目前HIV实验室检测项目主要是HIV抗体检测、抗原检测、核酸检测、CD4+/CD8+T淋巴细胞测定。检测目的不同,所使用的样品的采集、处理以及运送有不同的要求。

 

3.1  HIV抗体、抗原检测最常用的是血清或血浆:

3.1.1血清样品采集和处理:用一次性注射器或真空采血管抽取3-5ml静脉血,室温放置1-2小时,待血液凝固、血块收缩后再离心,尽可能地吸出血清备用。

3.1.2 血浆样品采集和处理:抗凝剂最常用的是K2EDTA,用一次性注射器抽取3-5ml静脉血,转移至加有抗凝剂的试管,或直接用加有抗凝剂的真空采血管,反复轻摇,室温放置,血浆和血细胞会分层,尽可能地吸出血浆备用。

3.1.3 送检要求:

3.1.3.1经HIV初筛实验室进行初筛检测后,若需上送的样品,只送血清或血浆,标本量要求达到1ml,最少不能低于0.7ml,不符合要求的标本将可能被拒收。标本用螺口的血清管装,在管外标记好病人姓名;每份标本需填写“HIV抗体复检送检单”,表格内资料要填写齐全,送检时与标本分开放置。

3.1.3.2应采用WHO提出的三级包装系统:

a  第一层容器:装样品,要求防渗漏。样品应置于带盖的试管内,试管上应有明显的标记,标明样品的编号或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料,以免碰碎。随样品应附有送检单,送检单应与样品分开放置。

b  第二层容器:要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器,可以装若干个第一层容器。将试管装入专用带盖的容器内,容器的材料要易于消毒处理。

c  第三层容器:放在一个运输用外层包装内,应易于消毒。在第三层容器外面要贴标签(数量,收、发件人)。

3.1.4 各送检单位将待检的样品及所附的“HIV抗体复检化验单”、样品检测申请单送到中心一楼门诊的样品受理处进行受理。联系电话为020-84451366-8085。

 

3.2  HIV核酸定性检测最常用的是血清、血浆或血细胞:

3.2.1 血清样品采集和处理:同3.1.1。

3.2.2 血浆和血细胞样品采集和处理:抗凝剂最常用的是K2EDTA,采集的抗凝血应在4-8小时内分离PBMC和血浆,否则应在24-48小时内分离血浆和血细胞。

3.2.3 样品的运送和保存:4 ℃冷冻送检采集的抗凝全血,采集后务必在24小时内送到目的实验室。分离出的血清、血浆、血细胞、PBMC均马上放入-80℃冰箱备用。样品的包装同3.1.3.2。

3.2.4 各送检单位将待检的样品及样品检测申请单送到中心六楼的艾滋病检测确证中心实验室进行受理。联系电话为020-84460496、020-84451366转8147。

 

3.3 HIV核酸定量(病毒载量)测定最常用的是血浆:

3.3.1抗凝剂的选择:不同病毒载量检测方法选用不同的抗凝剂,最通用的是K2EDTA。

3.3.2 血浆样品采集和处理:同3.1.2。

3.3.3 样品的运送和保存:同3.2.3。

3.3.4 各送检单位将待检的样品及样品检测申请单送到中心六楼的艾滋病检测确证中心实验室进行受理。联系电话为020-84460496、020-84451366转8147。

 

3.4  CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞检测使用的样品是抗凝全血:

3.4.1 抗凝剂的选择:最常用的是K2EDTA。

3.4.2 抗凝全血的采集:用一次性注射器抽取3-5ml静脉血,转移至加有抗凝剂的试管,或直接用加有抗凝剂的真空采血管,采血后马上握住试管两端颠倒混匀数次,将血液与抗凝剂充分混匀,以防止凝固,但用力不可太猛,避免融血。

3.4.3 样品的运送和保存:

尽可能快地在24小时内将样品送至目的实验室。在室温下(18-23℃)保存和运送样品,避免过冷和过热,一般春、秋、冬季无需冷藏,天气太热时,需要用一个隔热的容器装样品,并且把这个容器放于另一个有冰袋和吸热物质的容器中。样品的包装同3.1.3.2。

3.4.4各送检单位将待检的样品及样品检测申请单送到中心六楼的艾滋病检测确证中心实验室进行受理。不检测融血、结冰、凝血以及采样时间超过时限的样品。联系电话为020-84460496、020-84451366转8147。

 

4.支撑性文件

《全国艾滋病检测技术规范》(2004版)

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